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高效液相色譜儀的五大系統詳解
作者：依利特 來源：液相售后 2025-10-22 10:42:56
高效液相色譜儀是一款以用戶為核心的智能化分析儀器，不僅具備常規高效液相色譜的所有基本性能，還能兼容反控液相色譜工作站和通用色譜工作站。其新穎的外觀設計，加上更高的可靠性、穩定性和易操作性，使其成為實驗室分析的理想選擇。
高效液相色譜儀主要由進樣系統、輸液系統、分離系統、檢測系統和數據處理系統五大核心部分組成。下面將帶您詳細了解這五大系統的功能與特點。
表1.核心系統關鍵信息總覽
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一、進樣系統
進樣系統通常采用隔膜注射進樣器或高壓進樣閥來完成樣品引入操作，能夠保證進樣量的高度一致性。這種恒定的進樣方式顯著提高了分析結果的重復性和準確性，對于需要高精度數據的實驗尤為重要。
二、輸液系統
輸液系統由高壓泵、流動相貯存器和梯度儀三部分組成。高壓泵的工作壓強范圍通常為1.47~4.4×10?Pa，具有可調節且穩定的流速特性。高壓環境下的流動相能夠有效降低樣品在色譜柱中的擴散效應，同時加快樣品在柱內的移動速度，這不僅有助于提高分離分辨率，還能更好地保持樣品的生物活性和回收效率。流動相貯存器和梯度儀的配合使用，使流動相能夠根據固定相和樣品的特性進行調整，包括改變洗脫液的極性、離子強度、pH值等參數。
三、分離系統
分離系統包括色譜柱、連接管和恒溫器等關鍵組件。色譜柱通常長度為10~50cm（需要時可使用連接管串聯多根色譜柱），內徑為2~5mm，由優質不銹鋼、厚壁玻璃管或鈦合金等材料制成。
柱內填充有直徑為5~10μm的固定相，由基質和固定液構成。固定相基質通常采用機械強度高的樹脂或硅膠，具有惰性好、多孔性強和比表面積大的特點。這些基質表面經過機械涂漬或化學偶聯處理，可連接磷酸基、季胺基、羥甲基、苯基、氨基或不同長度碳鏈的烷基等功能基團。
這種精密的固定相設計對結構不同的物質具有良好的選擇性。例如，在多孔性硅膠表面偶聯豌豆凝集素（PSA）后，能夠特異性地分離成纖維細胞中的特定糖蛋白。
固定相基質顆粒微小，使柱床能夠達到高度均勻和致密狀態，有效降低渦流擴散效應。同時，微孔淺、傳質路徑短的特點有助于縮小譜帶寬度，提高分離分辨率。根據塔板理論，基質粒度越小，理論塔板數N越大，分離效率越高。恒溫器可將溫度從室溫調節至60℃，通過改善傳質速度來縮短分析時間，進一步提升色譜柱的分離效率。
四、檢測系統
高效液相色譜儀常用的檢測器主要有三種：
表2.常用檢測器簡要對比
紫外檢測器
適用于對紫外光或可見光有吸收的樣品檢測。其優勢在于應用范圍廣（可用于蛋白質、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素等多種物質）、靈敏度高（檢測下限達10?1?g/mL）、線性范圍寬，同時對溫度和流速變化不敏感，適合梯度洗脫樣品的檢測。
示差折光檢測器
適用于所有與流動相折光率不同的樣品組分檢測，特別常用于糖類化合物的分析。這種檢測器通用性強、操作簡便，但靈敏度相對較低（檢測下限為10??g/mL），且對流動相變化敏感，因此不適用于痕量分析和梯度洗脫檢測。
熒光檢測器
專門適用于具有熒光特性的有機化合物檢測，如多環芳烴、氨基酸、胺類、維生素和某些蛋白質等。其大特點是靈敏度極高（檢測下限達10?12~10?1?g/mL），既適合痕量分析，也適用于梯度洗脫樣品的檢測。
五、數據處理系統
數據處理系統負責對測試數據進行采集、存儲、顯示、打印和進一步處理，確保樣品的分離、制備或鑒定工作能夠準確、高效地完成。現代數據處理系統通常配備智能化的色譜工作站，提供友好的用戶界面和強大的數據分析功能，大大提升了實驗工作的便捷性和結果的可信度。
表3.色譜柱選型簡要指南?
各系統核心作用
通過以上五大系統的協同工作，高效液相色譜儀能夠為實驗室提供可靠、精準的分析結果，滿足各種復雜的分析需求。
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